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玻璃组培瓶前沿信息_玻璃的种类大全(2024年11月实时热点)

内容来源：零配件导航所属栏目：教程更新日期：2024-11-29

玻璃组培瓶

𐟌🧃Ÿ草转基因方法详解𐟌🊦œ€近有很多朋友问关于烟草转基因的方法，今天就来详细讲解一下。如果你需要更详细的内容，可以留下邮箱哦。首先，用于做转基因的烟草苗子一定要壮一些，无菌苗长出来后可以接种到含糖的培养基上，光照一定要给足，不然苗子长出来病蔫蔫的，做转基因的时候就会死掉哦。其实有很多细节，之后有机会再开一贴单独聊。接下来是具体的操作步骤：准备无菌组培玻璃瓶、1/2MS播种培养基、无菌水、75%的酒精及10%的NaCl溶液等。将适量的种子倒入灭菌的组培瓶中，加入适量75%酒精，轻轻晃动瓶子快速消毒种子1分钟；倒掉酒精用无菌水清洗一次后，倒入适量的10%NaCl溶液（84消毒液），放置在80~100rpm摇床上避光消毒20分钟。倒掉NaCl溶液并用无菌水洗涤4-5次，将消毒清洗后的种子均匀播种到1/2MS培养基上，放入光照培养箱进行培养（光培养16h、25℃，暗培养8h、20℃）待种子发芽后（约14天），转入组培瓶中继续培养。待种子培养约40-50天后，选取处于即将长出真叶状态的幼苗，用手术刀片切去子叶的叶柄及叶尖部分，保留下来的中间部分既是外植体（必要时可选取茎段做外植体），尽量保证所切外外植体两端伤口的平整，然后转移至PC1固体培养基上，每板放置15个左右的外植体，20℃暗培养1天。取100ul保存的待转化农杆菌接种于LB培养基中，加入相应浓度的抗生素（Rif+Gen+Kan）及AS，28℃、230rpm扩繁培养至OD=0.8~1.0时，根据自身操作情况，吸取适量菌液，5000rpm离心5分钟，去除上清液，用KC液体培养基重悬并清洗菌团。再以5000rpm离心5分钟，去除上清液，加入相应体积的KC液体培养基重悬菌团使其OD=0.1。按照每板PC1培养基上使用2-3mL的农杆菌侵染液用量，将侵染液均匀铺开在培养基上，使外植体的伤口部分与侵染液充分接触，其余部分保持干燥，静置10分钟后，吸走多余侵染液，侵染后的外植体于20℃暗培养2天。将暗培养2天后的外植体转移到初次筛选培养基2Z中，每12-15天根据外植体分化情况重新转一次2Z培养基。待外植体上长出分化的芽后，将其转移到继代培养基1Z中，同样每12-15天重新转一次1Z培养基。待外植体在1Z培养基上长出有独立主茎的茎上部分后，将主茎芽体切下并插入生根培养基ENR中，15-25天后形成根。希望这些步骤能帮到你！如果有任何问题或需要更详细的解释，欢迎随时联系我哦。

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